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Browsing Teses by Author "Araujo, Laura Helena"

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    Prospecção de moléculas como possíveis moduladores para a metacaspase-2 (tbMCA-IIa) de Trypanossoma brucei
    (Universidade de Mogi das Cruzes, 2024) Araujo, Laura Helena
    As metacaspases desempenham um papel importante na regulação da morte celular programada, especialmente em tripanossomatídeos como o Trypanosoma brucei, agente causador da Tripanossomíase Humana Africana (THA), doença esta que enfrenta desafios no tratamento devido à eficácia limitada e efeitos colaterais dos medicamentos existentes, tornando necessária a busca por novas moléculas terapêuticas eficazes e seguras. Estratégias inovadoras, como triagens fenotípicas para o desenvolvimento de inibidores seletivos, centrada nas proteases como alvos terapêuticos, também desempenham um papel relevante no progresso de tratamentos antitripanossoma. Nesse estudo foram testadas moléculas derivadas de compostos naturais para avaliar a capacidade de inibição da atividade da metacaspase-2 de Trypanosoma brucei, e também foi realizada a construção de um sistema celular de seleção de inibidores específicos para a TbMCA-IIa. Os resultados apontaram que as moléculas derivadas de éter de oxima (AO-7, AO-12 e EO-20) e compostos derivados de chalconas e flavonoides (EM-1A, EM-1B, EM-1C e EM-F12C) mostraram eficácia como inibidores, com destaque para AO-12, revelando-se não competitivo, e para os compostos EM-1A, EM-1B, EM-1C e EM-F12C, com valores de IC50 mais baixos e mecanismos de inibição competitivos e não-competitivos. Após a clonagem bem-sucedida do gene da TbMCA-IIa em um plasmídeo de baixa cópia, foram realizados testes utilizando CaCl2 para avaliar o crescimento celular, demonstrando que a expressão da metacaspase afetou significativamente o crescimento, enquanto que o clone em pET-28a(+) mostrou maior eficiência com 1 mM de CaCl2. Além disso, no experimento realizado com o gene da TbMCA-IIa em pET-28a(+) foi observado que a adição de glicose influenciou o crescimento celular. Esses testes validam a construção do sistema celular de seleção de inibidores, permitindo futuros testes com bibliotecas de inibidores.